Ang Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) usa ka sensitibo ug paspas nga teknik nga panguna nga gigamit aron mahibal-an ang kadaot ug pag-ayo sa DNA sa indibidwal nga mga selyula. Ang ngalan nga "Comet Assay" naggikan sa kinaiya nga sama sa kometa nga porma nga makita sa mga resulta: ang nucleus sa selula nagporma sa "ulo," samtang ang nadaot nga mga tipik sa DNA molalin, nga nagmugna og "ikog" nga susama sa usa ka kometa.
Prinsipyo
Ang prinsipyo sa Comet Assay gibase sa paglalin sa mga tipik sa DNA sa usa ka electric field. Ang intact DNA nagpabilin sulod sa cell nucleus, samtang ang nadaot o tipik nga DNA molalin paingon sa anode, nga nahimong “ikog” sa kometa. Ang gitas-on ug intensity sa ikog direkta nga katumbas sa gidak-on sa kadaot sa DNA.
Pamaagi
- Pagpangandam sa Cell: Ang mga selyula nga sulayan gisagol sa low-melting-point agarose ug ipakatap sa mga slide sa mikroskopyo aron mahimong uniporme nga layer.
- Cell Lysis: Ang mga slide giunlod sa usa ka lysis solution aron makuha ang cell lamad ug nuclear membrane, nga ibutyag ang DNA.
- Electrophoresis: Ang mga slide gibutang sa usa ka electrophoresis chamber ubos sa alkaline o neyutral nga mga kondisyon. Ang nadaot nga mga tipik sa DNA molalin paingon sa positibong electrode ubos sa impluwensya sa electric field.
- Pagmantsa: Human sa electrophoresis, ang mga slide namantsahan og fluorescent dye (pananglitan, ethidium bromide) aron makita ang DNA.
- Microscopic Pagtuki: Gamit ang fluorescence microscope o espesyal nga software, ang mga porma sa kometa gisusi, ug ang mga parameter sama sa gitas-on sa ikog ug intensity gisukod.
Imahe gikan sa biorender
Pagtuki sa Datos
Ang mga resulta gikan sa Comet Assay gi-evaluate base sa pipila ka mahinungdanong mga parameter:
- Ang gitas-on sa ikog: Nagrepresentar sa gilay-on sa paglalin sa DNA, nga nagpakita sa gidak-on sa kadaot sa DNA.
- Tail DNA Content: Ang porsyento sa DNA nga molalin ngadto sa ikog, nga sagad gigamit isip quantitative nga sukod sa kadaot sa DNA.
- Olive Tail Moment (OTM): Naghiusa sa gitas-on sa ikog ug sulod sa DNA sa ikog aron makahatag og mas komprehensibo nga sukod sa kadaot sa DNA.
Mga aplikasyon
- Mga Pagtuon sa Genotoxicity: Ang Comet Assay kaylap nga gigamit sa pag-assess sa mga epekto sa mga kemikal, droga, ug radiation sa cell DNA, nga naghimo niini nga usa ka importante nga himan alang sa genotoxicity testing.
- Toxicology sa Kalikopan: Nakatabang kini sa pag-analisar sa epekto sa mga pollutant sa kinaiyahan sa DNA sa mga organismo, nga naghatag ug mga panabut sa kaluwasan sa ekosistema.
- Medikal ug Klinikal nga Pagpanukiduki: Ang Comet Assay kay gigamit sa pagtuon sa DNA repair mechanism, cancer, ug uban pang DNA-related nga mga sakit. Gisusi usab niini ang epekto sa mga terapiya sa kanser sama sa radiotherapy ug chemotherapy sa DNA.
- Food and Agriculture Sciences: Gigamit sa pagsusi sa kaluwasan sa mga pestisidyo, mga additives sa pagkaon, ug uban pang mga substansiya, ug sa pagtuon sa ilang makahilo nga mga epekto sa mga modelo sa mananap.
Mga bentaha
- Taas nga pagkasensitibo: Makahimo sa pag-ila sa ubos nga lebel sa kadaot sa DNA.
- Yano nga Operasyon: Ang teknik mao ang prangka, nga naghimo niini nga angay alang sa high-throughput screening.
- Lapad nga Aplikasyon: Mahimo kining magamit sa lain-laing matang sa selula, lakip na ang mga selula sa mananap ug tanom.
- Mga Hagit sa Quantification: Samtang naghatag ug qualitative data sa DNA damage, quantitative analysis nagsalig kaayo sa software ug image analysis techniques.
- Eksperimental nga Kondisyon: Ang mga resulta mahimong maimpluwensyahan sa mga hinungdan sama sa oras sa electrophoresis ug pH, nga nanginahanglan ug mabinantayon nga pagkontrol sa mga kahimtang sa eksperimento.
Mga limitasyon
Ang Comet Assay usa ka bililhon nga himan sa biomedical research, environmental science, ug drug development tungod sa pagka-flexible niini ug taas nga pagkasensitibo sa pag-ila sa kadaot ug pag-ayo sa DNA. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)nagtanyag horizontal electrophoresis chamber alang sa comet assay. Welcome sa pagkontak kanamo aron hisgutan ang bahin saPagsusi sa Kometaprotocol.
Ang Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) adunay espesyal nga paggama sa mga instrumento sa electrophoresis sulod sa kapin sa 50 ka tuig uban sa among kaugalingong propesyonal nga technical team ug R&D center. Kami adunay kasaligan ug kompleto nga linya sa produksiyon gikan sa disenyo hangtod sa inspeksyon, ug bodega, ingon man suporta sa pagpamaligya. Ang among mga nag-unang produkto mao ang Electrophoresis Cell (tank/chamber), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System ug uban pa. Nagsuplay usab kami sa mga instrumento sa lab sama sa instrumento sa PCR, vortex mixer ug centrifuge para sa laboratoryo.
Kung naa kay plano sa pagpalit para sa among mga produkto, palihug ayaw pagpanuko sa pagkontak kanamo. Mahimo nimong ipadala kanamo ang mensahe sa email[gipanalipdan sa email]o[gipanalipdan sa email], o palihug tawagi kami sa +86 15810650221 o idugang ang Whatsapp +86 15810650221, o Wechat: 15810650221.
Palihug I-scan ang QR code aron idugang sa Whatsapp o WeChat.
Oras sa pag-post: Sep-20-2024