1. Klasipikasyon
Ang electrophoresis sa gel gibahin sa bertikal nga mga tipo (lakip ang column gels ug slab gels) ug horizontal type (panguna nga slab gels) (Figure 6-18). Sa kinatibuk-an, ang bertikal nga pagbulag gamay nga labaw sa pinahigda, apan ang pinahigda nga pag-andam sa gel adunay labing menos upat ka mga bentaha: adunay suporta sa ilawom sa tibuuk nga gel, nga gitugotan ang paggamit sa ubos nga konsentrasyon nga agarose; posible nga mag-andam og agarose gel nga mga palid sa lainlaing mga detalye; Ang pag-andam sa gel ug pagkarga sa sample mas sayon; ang electrophoresis chamber sayon sa pagtukod ug gasto-epektibo. Tungod kay ang pinahigda nga electrophoresis gihimo uban sa agarose gel plate nga bug-os nga nalubog sa mga 1mm ubos sa nawong sa electrophoresis buffer, gitawag usab kini nga submerged electrophoresis.
Electrophoresis Tank DYCP-31DN alang sa agarose gel electrophoresis
2.Buffer System
Sa pagbulag sa nucleic acid, kadaghanan sa mga sistema nagsagop sa padayon nga mga sistema. Ang kasagarang gigamit nga electrophoresis buffer naglakip sa TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L boric acid, 0.0024mol/L EDTA) buffer ug THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L sodium acetate, 0.0018mol/L EDTA) buffer. Kini nga mga buffer kasagarang giandam isip 10x stock solutions ug lasaw sa gikinahanglang konsentrasyon kung gamiton. Ang mga rate sa paglalin sa linear ug circular DNA sa agarose gel magkalainlain sa gigamit nga buffer. Sa THE buffer, ang rate sa paglalin sa linear DNA mas dako kaysa sa circular DNA, samtang sa TBE buffer, ang kaatbang mao ang tinuod.
3.Pagpangandam sa Agarose Gel
(1) Pag-andam sa Horizontal Agarose Gel
(a) Pag-andam sa gikinahanglan nga konsentrasyon sa agarose gel gamit ang 1x electrophoresis buffer.
(b) Init ang agarose aron makompleto ang pagkatunaw sa tubig nga nagbukal, sa magnetic stirrer, o sa microwave. Pabugnawa ang solusyon nga agarose ngadto sa 55°C ug idugang ang tina nga ethidium bromide (EB) ngadto sa kataposang konsentrasyon nga 0.5 μg/ml.
(c) Silyohan ang mga kilid sa bildo o acrylic nga mga plato nga adunay gamay nga kantidad sa agarose gel, butangi og suklay, ug ibutang ang mga ngipon sa suklay mga 0.5~1.0 mm ibabaw sa plato.
(d) Ibubo ang natunaw nga agarose gel solution nga padayon ngadto sa bildo o acrylic plate nga agup-op (ang gibag-on nagdepende sa gidaghanon sa DNA sample), paglikay sa pagpasulod sa mga bula sa hangin. Himoa nga kini molig-on nga natural sa temperatura sa lawak.
(e) Pag-ayo kuhaa ang suklay human sa hingpit nga solidification. Idugang ang angay nga kantidad sa electrophoresis buffer sa gel tank, pagsiguro nga ang gel plate naunlod mga 1 mm sa ilawom sa nawong sa electrophoresis buffer.
(2) Pag-andam sa Vertical Agarose Gel
(a) Kuhaa ang grasa o salin gikan sa bildo nga mga plato pinaagi sa paghugas gamit ang ethanol.
(b) Ibutang ang mga spacer plate taliwala sa atubangan ug likod nga mga dam, i-align ang mga kilid sa mga spacer plate sa atubangan ug likod nga mga dam, ug i-secure kini gamit ang mga clamp.
(c) Idugang ang 2% nga agarose sa 1x buffer taliwala sa mga ngilit sa spacer plates aron maporma ang 1 cm taas nga agarose plug sa ilawom sa gel casting chamber.
(d) Ibubo ang natunaw nga agarose gel sa gusto nga konsentrasyon, giandam sa 1x buffer, ngadto sa gel chamber hangtod sa 1 cm ubos sa ibabaw.
(e) Isulod ang suklay, likayan ang pagbitik sa mga bula sa hangin ilalom sa mga ngipon sa suklay. Usahay, ang mga kunot mahimong makita sa mga ngipon sa suklay sa panahon sa pagpabugnaw sa agarose gel; sa maong mga kaso, idugang lang ang pipila ka natunaw nga agarose sa ibabaw aron mapalig-on kini.
(f) Kuhaa ang sudlay. Aron malikayan ang buffer leakage sa loading slot, selyohan ang koneksyon tali sa agarose gel plate ug sa electrophoresis chamber nga adunay 2% nga agarose ug idugang ang gikinahanglan nga kantidad sa buffer.
(g) Idugang ang 1x electrophoresis buffer sa gel chamber.
(h) Pag-ayo nga ikarga ang mga sample sa DNA sa agarose gel sa ilawom sa buffer.
Dugang nga kasayuran bahin sa sukaranan nga kahibalo bahin sa agarose gel electrophoresis, among ipaambit sa sunod semana. Hinaut nga kini nga impormasyon makatabang sa imong eksperimento.
Ang Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) adunay espesyal nga paggama sa mga instrumento sa electrophoresis sulod sa kapin sa 50 ka tuig uban sa among kaugalingong propesyonal nga technical team ug R&D center. Kami adunay kasaligan ug kompleto nga linya sa produksiyon gikan sa disenyo hangtod sa inspeksyon, ug bodega, ingon man suporta sa pagpamaligya. Ang among mga nag-unang produkto mao ang Electrophoresis Cell (tank/chamber), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System etc.
Nangita na kami karon og mga kauban, ang OEM electrophoresis tank ug distributor giabiabi.
Kung naa kay plano sa pagpalit para sa among mga produkto, palihug ayaw pagpanuko sa pagkontak kanamo. Mahimo nimong ipadala kanamo ang mensahe sa email[gipanalipdan sa email]o[gipanalipdan sa email], o palihug tawagi kami sa +86 15810650221 o idugang ang Whatsapp +86 15810650221, o Wechat: 15810650221.
Palihug I-scan ang QR code aron idugang sa Whatsapp o WeChat.
Oras sa pag-post: Dis-07-2023