Panguna nga mga Teknik sa Agarose Gel Electrophoresis(2)

Pagpangandam sa Sampol ugNagkarga

Tungod sa paggamit sa usa ka padayon nga buffer system nga walay stacking gel sa kadaghanan sa mga kaso, ang mga sample kinahanglan nga adunay usa ka angay nga konsentrasyon ug usa ka gamay nga gidaghanon. Gamita ang apipettearon hinayhinay nga idugang ang sample, nga adunay 5-10 μg matag atabay, aron malikayan ang usa ka hinungdanon nga pagkunhod sa resolusyon. Kanus-aloading sample, kinahanglan nga palongon ang suplay sa kuryente. Ang sample kinahanglang adunay indicator dye (0.025% bromophenol blue o orange) ug sucrose (10-15%) o glycerol (5-10%) aron madugangan ang densidad niini, makonsentrar ang sample, ug mapugngan ang pagsabwag. Apan, usahay ang sucrose o glycerol mahimong hinungdan sa U-shaped bands sa mga resulta sa electrophoresis, nga mahimong malikayan pinaagi sa paggamit sa 2.5% Ficoll (polyvinylpyrrolidone).

1

Electrophoresis

Ang boltahe para sa electrophoresis mao ang 5-15 V/cm, kasagaran mga 10 V/cm. Alang sa pagbulag sa dagkong mga molekula, ang boltahe kinahanglan nga mas ubos, kasagaran dili molapas sa 5 V / cm.

2

Pagmantsa

Ang fluorescent dye ethidium bromide (EB) sagad gigamit alang sa pagmantsa aron makita ang mga banda sa DNA sa agarose gel. Ang EB mahimong mosal-ot tali sa base nga mga parisan sa mga molekula sa DNA, hinungdan nga ang EB mogapos sa DNA. Ang pagsuyup sa 260 nm ultraviolet nga kahayag sa DNA gibalhin sa EB, ug ang gigapos nga EB nagpagawas sa fluorescence sa 590 nm sa pula nga orange nga rehiyon sa makita nga kahayag nga spectrum. Ang pagmantsa sa gel sa usa ka 1 mmol/L MgSO4 nga solusyon sulod sa 1 ka oras makapakunhod sa background fluorescence tungod sa walay bugkos nga EB, nga makapasayon ​​​​sa pagkakita sa gamay nga kantidad sa DNA.

Ang EB dye adunay daghang mga bentaha: kini dali gamiton, dili makaguba sa mga nucleic acid, adunay taas nga pagkasensitibo, ug makahugaw sa DNA ug RNA. Ang EB mahimong idugang sa sample ug masubay gamit ang pagsuyup sa UV bisan unsang orasa. Human sa pagmantsa, ang EB mahimong makuha pinaagi sa pagkuha sa n-butanol.

Bisan pa, ang EB dye usa ka kusgan nga mutagen, ug ang mga pag-amping, sama sa pagsul-ob og polyethylene nga gwantis, kinahanglan buhaton sa panahon sa pagdumala. Ang Acridine orange kay kasagarang gigamit nga tina tungod kay makalahi kini sa single-stranded ug double-stranded nucleic acids (DNA, RNA). Nagpakita kini og berde nga fluorescence (530 nm) alang sa double-stranded nucleic acid ug pula nga fluorescence (640 nm) para sa single-stranded nucleic acid. Dugang pa, ang ubang mga tina sama sa methylene blue, methylene green, ug quinoline B mahimong gamiton sa pagmantsa.

Ang Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) adunay espesyal nga paggama sa mga instrumento sa electrophoresis sulod sa kapin sa 50 ka tuig uban sa among kaugalingong propesyonal nga technical team ug R&D center. Kami adunay kasaligan ug kompleto nga linya sa produksiyon gikan sa disenyo hangtod sa inspeksyon, ug bodega, ingon man suporta sa pagpamaligya. Ang among mga nag-unang produkto mao ang Electrophoresis Cell (tank/chamber), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System etc.

3

Nangita na kami karon og mga kauban, ang OEM electrophoresis tank ug distributor giabiabi.

Kung naa kay plano sa pagpalit para sa among mga produkto, palihug ayaw pagpanuko sa pagkontak kanamo. Mahimo nimong ipadala kanamo ang mensahe sa email[gipanalipdan sa email]o[gipanalipdan sa email], o palihug tawagi kami sa +86 15810650221 o idugang ang Whatsapp +86 15810650221, o Wechat: 15810650221.

Palihug I-scan ang QR code aron idugang sa Whatsapp o WeChat.

2


Oras sa pag-post: Dis-20-2023