Unsa ang polyacrylamide gel electrophoresis?

Polyacrylamide Gel Electrophoresis

Ang electrophoresis sa gel usa ka sukaranan nga teknik sa mga laboratoryo sa tibuuk nga mga disiplina sa biolohikal, nga gitugotan ang pagbulag sa mga macromolecule sama sa DNA, RNA ug mga protina. Ang lainlaing media ug mekanismo sa pagbulag nagtugot sa mga subset niini nga mga molekula nga mabulag nga mas epektibo pinaagi sa pagpahimulos sa ilang pisikal nga mga kinaiya. Alang sa partikular nga mga protina, ang polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) mao ang kasagaran nga pamaagi sa pagpili.

Ang PAGE usa ka teknik nga nagbulag sa mga macromolecules sama sa mga protina base sa ilang electrophoretic mobility, nga mao, ang abilidad sa mga analyte sa paglihok padulong sa usa ka electrode sa kaatbang nga bayad. Sa PAGE, kini gitino pinaagi sa bayad, gidak-on (molecular weight) ug porma sa molekula. Ang mga analyte molihok pinaagi sa mga pores nga naporma sa polyacrylamide gel. Dili sama sa DNA ug RNA, ang mga protina managlahi sa katungdanan sumala sa mga amino acid nga gilakip, nga makaimpluwensya kung giunsa nila kini pagdagan. Ang mga string sa amino acid mahimo usab nga maporma ang mga sekondaryang istruktura nga makaapekto sa ilang dayag nga gidak-on ug busa kung giunsa nila paglihok sa mga pores. Busa mahimo usahay nga tilinguhaon nga i-denatur ang mga protina sa wala pa ang electrophoresis aron ma-linearize kini kung gikinahanglan ang mas tukma nga pagbanabana sa gidak-on.

SDS PAGE

Ang sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis usa ka teknik nga gigamit sa pagbulag sa mga molekula sa protina sa masa nga 5 hangtod 250 kDa. Ang mga protina gibulag lamang base sa gibug-aton sa molekula niini. Ang sodium dodecyl sulfate, usa ka anionic surfactant, gidugang sa pag-andam sa mga gel nga nagtakuban sa intrinsic nga mga singil sa mga sample sa protina ug naghatag kanila og susama nga bayad sa mass ratio. Sa yano nga mga pulong, kini nag-denature sa mga protina ug naghatag kanila og negatibo nga singil.

Lumad nga PAGE

Ang Native PAGE kay usa ka teknik nga naggamit ug non-denatured gels para sa pagbulag sa mga protina. Dili sama sa SDS PAGE, walay denaturing agent ang idugang sa pag-andam sa mga gel. Ingon nga resulta, ang pagbulag sa mga protina mahitabo base sa bayad ug gidak-on sa mga protina. Niini nga teknik, ang conformation, folding ug amino acid nga mga kadena sa mga protina mao ang mga hinungdan nga gisaligan sa pagbulag. Ang mga protina dili madaot sa niini nga proseso, ug mahimong makuha human sa pagkompleto sa panagbulag.

Giunsa pagtrabaho ang polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE)?

Ang sukaranan nga prinsipyo sa PAGE mao ang pagbulag sa mga analyte pinaagi sa pagpasa niini sa mga pores sa usa ka polyacrylamide gel gamit ang usa ka electric current. Aron makab-ot kini, ang usa ka acrylamide-bisacrylamide mix kay polymerized (polyacrylamide) pinaagi sa pagdugang sa ammonium persulfate (APS). Ang reaksyon, nga gi-catalyzed sa tetramethylethylenediamine (TEMED), nagporma sa usa ka pukot sama sa istruktura nga adunay mga pores diin ang mga analyte makalihok (Figure 2). Kung mas taas ang porsyento sa kinatibuk-ang acrylamide nga gilakip sa gel, mas gamay ang gidak-on sa pore, busa mas gamay ang mga protina nga maagian. Ang ratio sa acrylamide ngadto sa bisacrylamide makaapekto usab sa gidak-on sa pore, apan kini kanunay nga kanunay. Ang gagmay nga mga gidak-on sa pore makapakunhod usab sa katulin diin ang gagmay nga mga protina makahimo sa paglihok sa gel, pagpaayo sa ilang resolusyon ug pagpugong kanila sa pagdagan sa buffer nga paspas kung magamit ang karon.

Kagamitan alang sa Polyacrylamide Gel Electrophoresis

Gel Electrophoresis Cell (Tank/Kwarto)
Ang tangke sa gel alang sa polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) lahi sa tangke sa agarose gel. Ang tangke sa agarose gel pinahigda, samtang ang tangke sa PAGE patindog. Pinaagi sa bertikal nga electrophoresis cell (tangke/chamber), usa ka nipis nga gel (kasagaran 1.0mm o 1.5mm) ibubo sa taliwala sa duha ka bildo nga mga plato ug gitaod aron ang ubos sa gel maunlod sa buffer sa usa ka lawak ug ang ibabaw maunlod sa buffer sa laing lawak. Sa diha nga ang kasamtangan nga gigamit, ang usa ka gamay nga kantidad sa buffer migrate pinaagi sa gel gikan sa ibabaw nga lawak ngadto sa ubos nga lawak. Uban sa lig-on nga mga clamp aron garantiya nga ang asembliya magpabilin sa usa ka tul-id nga posisyon, ang mga ekipo nagpadali sa paspas nga pagdagan sa gel nga bisan ang pagpabugnaw nga moresulta sa lahi nga mga banda.

Ang Beijing Liuyi Biotechnology Co, Ltd. Ang mga modelo nga DYCZ-20C ug DYCZ-20G mga bertikal nga electrophoresis cells (mga tangke/chambers) para sa DNA sequencing analysis. Ang pila sa mga bertikal nga electrophoresis cells (tank/chambers) kay compatible sa blotting system, sama sa model DYCZ-24DN, DYCZ-25D ug DYCZ-25E kay compatible sa Western Blotting system model DYCZ-40D, DYCZ-40G ug DYCZ-40F, nga gigamit alang sa pagbalhin sa molekula sa protina gikan sa gel ngadto sa lamad. Pagkahuman sa electrophoresis sa SDS-PAGE, ang Western Blotting usa ka teknik aron mahibal-an ang usa ka piho nga protina sa usa ka sagol nga protina. Mahimo nimong pilion kini nga mga sistema sa blotting sumala sa mga kinahanglanon sa eksperimento.

Electrophoresis Power Supply
Aron mahatagan ang elektrisidad alang sa pagpadagan sa gel, kinahanglan nimo ang usa ka suplay sa kuryente sa electrophoresis. Sa Liuyi Biotechnology naghatag kami usa ka lainlaing mga suplay sa kuryente sa electrophoresis alang sa tanan nga aplikasyon. Ang modelo nga DYY-12 ug DYY-12C nga adunay taas nga stable nga boltahe ug kasamtangan makatagbo sa taas nga boltahe nga kinahanglanon nga electrophoresis. Kini adunay function sa stand, timing, VH ug step-by-step nga aplikasyon. Sila mao ang sulundon nga alang sa IEF ug DNA sequencing electrophoresis aplikasyon. Alang sa kinatibuk-ang aplikasyon sa protina ug DNA electrophoresis, kami adunay modelo nga DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, ug uban pa, nga init usab nga mga suplay sa kuryente nga adunay mga electrophoresis cells (tank / chambers). Mahimo kining gamiton alang sa tunga-tunga ug ubos nga boltahe nga mga aplikasyon sa electrophoresis, sama sa paggamit sa lab sa eskwelahan, lab sa ospital ug uban pa. Dugang nga mga modelo alang sa mga suplay sa kuryente, palihug bisitaha ang among website.

Ang Liuyi brand adunay labaw pa sa 50 ka tuig nga kasaysayan sa China ug ang kompanya makahatag ug lig-on ug taas nga kalidad nga mga produkto sa tibuok kalibutan. Sa pag-uswag sa mga tuig, takus kini sa imong pagpili!

Alang sa dugang nga kasayuran bahin kanamo, palihug kontaka kami pinaagi sa email[gipanalipdan sa email] or [gipanalipdan sa email].

Mga pakisayran alang sa Unsa ang polyacrylamide gel electrophoresis?
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel electrophoresis, Giunsa Kini Pagtrabaho, Mga Variant sa Teknik, ug Ang mga aplikasyon niini