Prinsipyo
Ang cellulose acetate film electrophoresis usa ka pamaagi sa electrophoresis gamit ang cellulose acetate film isip suporta.Ang panghitabo diin ang mga gikarga nga mga partikulo mobalhin padulong sa kaatbang nga elektrod sa ilawom sa aksyon sa electric field gitawag nga electrophoresis.Tungod kay ang matag protina adunay usa ka piho nga isoelectric nga punto, kung ang usa ka protina ibutang sa usa ka solusyon nga adunay pH nga mas ubos kaysa sa isoelectric nga punto niini, ang protina mahimong positibo nga ma-charge ug molihok padulong sa negatibo nga electrode.Sa kasukwahi, kini mibalhin sa positibo nga poste.Tungod kay ang katulin sa mga molekula sa protina nga naglihok sa usa ka natad sa kuryente adunay kalabotan sa ilang bayad, ang porma ug gidak-on sa mga molekula, ang lainlaing mga protina mahimong mabulag pinaagi sa electrophoresis.Ang serum adunay lain-laing mga protina, nga ang tanan adunay isoelectric nga mga punto sa pH7.5 o ubos pa.Kung ang serum gibutang sa pH 8.6 buffer aron magpadagan sa electrophoresis, ang tanan nga mga protina sa serum negatibo nga gikargahan ug molihok padulong sa positibo nga bahin sa natad sa kuryente.Tungod kay ang lainlaing mga protina sa serum adunay lainlaing mga singil sa parehas nga pH, ang mga partikulo sa molekula lahi sa gidak-on, ug sa ingon ang katulin sa paglalin lahi, ug kini gibulag sa electrophoresis.Ang isoelectric nga mga punto ug molekular nga gibug-aton sa serum nga mga protina gipakita sa lamesa sa ubos:
| Protina | Isoelectric nga mga punto (PI) | Molekular nga gibug-aton |
| Albumin | 4.88 | 69 000 |
| α1-gloulin | 5.00 | 200 000 |
| α2-gloulin | 5.06 | 300 000 |
| β-gloulin | 5.12 | 9 000~150 000 |
| γ-gloulin | 6.85~7.50 | 156 000~ 300 000 |
Ang eksperimento mao ang pagbulag sa lainlaing mga protina sa serum sa dugo nga adunay cellulose acetate membrane (abbr. CAM) isip suporta nga media.Ang CAM usa ka matang sa foamed loosepelikula nga adunay maayo nga uniporme, ug ang gibag-on mao ang 0.1mm-1.5mm, nga adunay usa ka piho nga pagsuyup sa tubig.
Mga materyales, instrumento ug reagents alang sa CAM Electrophoresis
Mga sampol:himsog nga serum sa dugo sa tawo
Instrumento:suplay sa kuryente DYY-6C, tangke sa electrophoresis DYCP-38C, superyor nga sample loading WD-9404
Ang mga reagents
1) cellulose acetate lamad 7X9cm
2) PH 8.6 barbitol buffer solution (ionic strength 0.05-0.09, kini 0.06tid time.): kuhaa ang 1,84g Diethyl barbituric acid, ug dayon kuhaa ang 1.03g Diethyl sodium pentobarbital, idugang ang pipila ka distilled water aron init aron matunaw, ug himoon hangtod sa 1000ml;
3) Mantsa: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, idugang ang 100ml nga distilled water;
4) TBS/T o PBS/T: 45ml 95% ethanol, 5ml glacial acetic acid, makadugang 50ml distilled nga tubig;
5) Paglimpyo nga Solusyon: 70ml anhydrous ethanol, 30ml glacial acetic acid.
Eksperimento nga Method
1) Pag-andam sa lamad: Ituslob ang lamad sa barbitol buffer solution 30min-8h, ug kuhaa kini, kuhaa ang dugang nga solusyon pinaagi sa absorbent nga papel.
2) Pag-load sa mga sample: Ilha ang bagis nga kilid ug hamis nga kilid sa lamad, ug markahi ang linya sa 1.5cm nga gilay-on ngadto sa tumoy nga tumoy sa bagis nga bahin.I-load ang mga sample pinaagi sa superyor nga sample loading tool sa bagis nga bahin.Mubo nga sulat: Ang mga sample kinahanglan nga ikarga sa bagis nga bahin sa lamad.Human ang mga sample sa serum hingpit nga nasulod sa lamad, ibalik ang lamad, ibutang ang bagis nga kilid (nga adunay mga sample) nga mag-atubang sa tangke, ug ang katapusan nga adunay mga sample ibutang sa negatibo nga elektrod.
3) Electrophoresis: I-on ang suplay sa kuryente, 0.4～0.6m A / cm lamad, ang oras sa pagdagan mao ang 30-45 min.Human sa pagpadagan sa electrophoresis, i-off ang gahum.
4) Mantsa ug limpyo: Kuhaa ang lamad gikan sa tangke, ug ituslobit ngadto sa tina nga solusyon sa 5 min, ug dayon limpyohan kini sa solusyon sa pagpanglimpyo balik-balik sa 3-4 ka beses hangtud nga ang kolor sa background klaro.Ang mga protina sa serum kinahanglan nga ipakita sa mga banda, ug kasagaran adunay lima ka mga zone, porma sa tumoy nga tumoy sa gimarkahan nga linya, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.
5) Pagpreserba: ibutang ang uga nga electrophoresisbandasa paghinlo nga solusyon alang sa 10-15 ka minuto, ug unya kuhaa kini ug ibutang kini sa usa ka limpyo nga baso, pagkahuman kini mamala, kini mahimong usa ka transparent nga pelikulabanda.
EksperimentoResulta
Ang epekto sa pagbulag sa mga sample sa serum maayo, ug wala’y band tailing phenomenon.Ang pagkasubli sa mga resulta magkalainlain tungod sa mga pamaagi sa pagsulay ug mga pamaagi sa eksperimento, ug ang pagkasubli taas.
Konklusyon
Ang paspas nga clinical electrophoresis detection system (Electrophoresis tankDYCP-38C,suplay sa kuryenteDYY-6C ug superyor nga sample loading WD-9404) nga gihimo sa amongkompanya Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdnakab-ot ang mga kinahanglanon sa eksperimento,ugang mga resulta mao ang reproducible, yano ug paspas, angay alang sapagtudlopanukiduki.
Beijing LiuyiAng Biotechnology Co., Ltd nag-espesyalisar sa paghimo sa mga produkto sa electrtophoresis alang sa industriya sa siyensya sa kinabuhi, ngaadunay labaw pa sa 50 ka tuig nga kasaysayan sa China ug ang kompanya makahatag lig-on ug taas nga kalidad nga mga produkto sa tibuuk kalibutan.Sa mga tuig nga pag-uswag, takus kini sa imong pagpili!
Nangita na kami karon og mga kauban, ang OEM electrophoresis tank ug distributor giabiabi.
Alang sa dugang nga kasayuran bahin kanamo, palihug kontaka kami pinaagi sa email[gipanalipdan sa email]o[gipanalipdan sa email].
Oras sa pag-post: Nob-14-2022